嘌呤、嘧啶和辅酶，由于它们在生物化学领域和酶系统中的重要性，,因而有一定的分析价值。辅酶是许多酶反应的必需因子，没有它们，这样的系统就不能发挥作用。正因为如此，所以这些物质最好是借助它们所参与的酶反应来进行检测。
酶的激活剂是指那些能使没有活性的、或者只有低活性的酶转变为高效催化剂的物质，一般情况下，这种转变只要非常低浓度的激活剂就可实现。
许多嘌呤和辅酶在溶液中具有天然的吸收谱带与荧光(表1），这一特征可用来跟踪它们在酶促反应中的出现与消失，从而也就为它们本身的检测、也为各种底物和酶的检测提供了一种方法。腺核苷、AMP、ADP及ATP的荧光光谱示于图2；核黄素、FMN及FAD的荧光光谱和pH的关系示于图3。
表1辅酶和嘌呤的光吸收与荧光特征
图2腺嘌呤及其核苷、核苷酸在7NH2SO4中的荧光光谱激发波长nm，样品浓度5微克/毫升。
图3pH对核黄素、黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）荧光的影响
尼克酰胺核苷酸以氧化和还原两种形式存在(图4)。还原型的NAD（NADH）和NADP（NADPH）在nm处具有最大吸光率(图5)，并发强的荧光(入激发=nm；入发射=nm。文献中介绍了一种检测组织中NADH和NADPH的方法，它就是利用这些物质的天然荧光进行的。有文献讨论了溶剂、pH和痕量金属对荧光的影响。
图4氧化型和还原型的尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸
图5NAD(DPN)(o-o)和NADH(DPNH)(·-·)的吸光率曲线
图6尼克酰胺核苷酸的荧光光谱
图示值为最大荧光之百分数。按绝对荧光值(NADH)大约为1/8。
