BCA蛋白质浓度检测法，近些年被科研工作者广泛选用，是目前最常用测定蛋白质方法之一。
?原理
BCA（bicinchoninincacid）与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂混合一起即成为苹果绿，即BCA工作试剂。在碱性条件下，BCA与蛋白质结合时，蛋白质将Cu2+还原为Cu+，工作试剂由原来的苹果绿色变为紫色复合物。nm下其光吸收强度与蛋白质浓度成正比。
今天就给大家推荐一款BCA蛋白浓度测定试剂盒，是必拓生物根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一——BCA法研制而成。实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。
?成分
试剂A
mL
试剂B
2mL
标准蛋白（BSA）
1mL×2，1mg/mL
?保存条件
运输温度：室温（标准蛋白4～8℃运输）
保存温度：室温（标准蛋白-20℃保存）
有效日期：12个月
?使用方法
——方法一：96孔板法——
1.配制BCA工作液：根据标准品和样品数量，按50体积试剂A，1体积试剂B配制适量BCA工作液。充分混匀。
2.将蛋白标准品按0μL，1μL，2μL，4μL，6μL，8μL，10μL加入96孔板的蛋白标准品孔中。加灭菌双蒸水补足到10μL。取10μL待测样品加入96孔板的待测样品孔中。每个测定要做2～3个平行。
3.向待测样品孔和蛋白标准品孔中各加入μLBCA工作液（即样品与工作液的体积比为1:20），混匀。
4.37℃温浴30min。冷却至室温。
5.酶标仪nm波长下测定吸光度。
6.制作标准曲线。从标准曲线中求出样品浓度。
——方法二：试管法——
1.配制工作液：根据标准品和样品数量，按50体积试剂A，1体积试剂B配制适量BCA工作液，充分混匀。工作液配制的量要与测定所用的比色杯对应。每个测定要做2～3个平行。本处列举的比色体系所用的是0.5mL的比色杯。如比色杯规格不同，体系需要放大到实验将采用的比色杯准确读数所需要的体积。
2.BSA标准品和样品的准备：样品用水或其它不干扰显色反应的缓冲液配制，使待测定的浓度位于标准曲线的线性部分。每个反应准备3个平行测定。标准曲线一般5~6个点即可。根据样品的估测浓度确定各点的具体浓度。稀释BSA时可以用水或与样品一致的溶液。如待测样品的浓度约为μg/mL，可按下表的次序加入BSA标准品、样品及BCA工作液。
3.取适量体积的标准蛋白，以蛋白液：工作液=1:20的比例混匀。37℃温浴30min。冷却至室温。
4.将样品与标准品在nm波长下测定吸光度。
原价元，扫下方湖南治疗白癜风的医院中科白癜风
