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biodo年全国生物决赛考前专家指导（理论＆实验）
年8月16日，来自全国29个省（市）的30支代表队共人齐聚长沙一中。报到手册上显示将在年8月17日下午14点30分到16点30分将进行理论考试，不知道大家注意到没有，与年相比，考试时间缩短了半小时。不过，在里进行了特别说明：下午4点半可以提前交卷，5点下考。这表明试题的设计应该还是按2个半小时来进行的。
由此表明，年的国赛理论卷对今年有非常大的参考价值，大家应认真回顾该卷题量、题型、内容等。
年全国生物决赛的理论考试答题时间是分钟，全卷共题，包括单选84题、多选40题和混选14题，单选每题1分，多选每题1.5分，共计分，试题册厚达27页A4纸。
仔细分析年联赛、年国赛、年联赛三份真题，不难发现双年的联赛与国赛命题已经形成了一种规律，“那就是纯粹记忆的题大大减少了，尤其是很深的动植物分类题更少了。”大量的试题以科研论文为背景，论文方向以动物行为、生态、动物生理、细胞等学科为多。考查方式主要有两种：大多数是考查学生的实验分析能力——科研方法，也总有那么几个题直接考实验数据处理——生物统计。关于论文背景科研方法的考查，要求学生有充足的经验和技巧，否则速度和准度都达不到。
首先，科学研究离不开技术手段，因此考前百度查查常见技术的原理，以及结果怎么看这些都很重要。例如，下图所示的6道题来自年“五一”北斗学友“BST6/冲刺营”全真模考（一）：
这组题里涉及到了研究蛋白质相互作用的多种技术，而第27题B选项所述的“蛋白质免疫共沉淀”技术恰巧在后面的年全国生物联赛第14～20题（如下图）考查了，如果对此技术不了解的考生，解答起来显然是非常困难的，这提醒考生需要多了解一些现代生物技术的原理，比如还有GSTpull-down、酵母双杂交、crispr/cas9、Cre/loxp系统、RNAi、PCR（定点突变、基因融合等）……
其次，动物行为、生态、细胞、动物生理的题有很大一部分是来源于文献的，这类题常考查学生对背景资料的分析能力。从今年公布的命题专家组成员可以知道，与年无太大差异，这说明这类题的形式估计总体稳定，提醒考生应将做过的论文背景试题拿出来再领悟，每位出题人都有他（她）的个性思维习惯，应好好琢磨下这个习惯是什么。
再次，按习惯，总有几道题直接考查学生对《生物统计学》的掌握情况。一般而言，这个主要也就是考点数据处理上的统计学判断。比如，对于单一样本、两个独立样本、两个关联样本、多个独立样本、多个关联样本分别应该采用哪种检验方法来比较平均数是否存在显著性差异。又如，P值、变异系数、相关系数、决定系数、中位数、正态性、方差同质性等等概念的理解。再如，独立性、适合性、差异性、方差齐性、正态性的一般检验方法。
最后，也是最重要的，如果说双年命题有规律，那最大的规律就是随心所欲，你拿到考卷后，哪种情况可能都可能会发生。所以，拿到试卷后务必先粗略的看看，做到心中有数，比如有多少道题，有多少页，论文背景的题多不多，这些将会非常大程度地决定你的答题时间分配。如果一旦判断答题时间比较紧，那必须调整为高速策略，确保能顺利答完题、涂完卡。
按双年国赛实验命题规律，实验内容往往涉及动物（包括动物生态和动物行为）、植物（包括植物生态）、遗传、细胞、生化、分子等学科。我们先来看今年生物国赛的专家组：
在后面14位专家组的委员中，从这些老师的专业来看，也确实囊括了动物（包括动物生态和动物行为）、植物（包括植物生态）、遗传、细胞、生化、分子等学科方向。例如，在北京大学生命科学院李大建、王戎疆、龙玉、薛堃等老师是负责动物实验或生态和动物行为理论方向的，孟世勇、贺新强等老师是负责植物实验方向的，佟向军、辛广伟等老师是负责遗传实验方向的，张泉、苏都莫日根等老师是负责细胞实验方向的，王青松等老师是负责生化实验方向的，郝福英、毕群等老师老师是分子实验方向的。由此推测，今年的国赛实验应该延续双年命题的特点，参加了年北斗学友“BST+/金牌营”特训班和模考班的同学可以好好回顾一下所做过的实验和考过的实验，因为该课程完全是按照双年国赛命题方向设计的。
以下为实验举例，可供考前查阅、回顾：
一、动物实验
1.动物的基本组织
2.线虫的形态结构及发育
3.斑马鱼的形态结构及发育
4.软体动物
5.昆虫的解剖和分类
6.生态和动物行为资料分析
二、植物实验
1.植物多样性与环境
2.模式植物的形态结构及发育
三、遗传实验
斑马鱼原位杂交实验
1.线虫、果蝇、斑马鱼的雌雄和突变体识别。
2.染色体观察及果蝇平衡染色体：通过微观（观察不同物种染色体玻片标本）和宏观（观察携带显性标记基因的平衡染色体果蝇[Balancer]表型，包括第一、第二、第三平衡染色体果蝇）水平染色体观察，了解染色体是代与代之间遗传信息传递的载体。通过追踪染色体上的表型，准确无误地区分携带不同基因型的后代，进而定位和追踪基因。
3.果蝇唾腺染色体制备及观察。
4.果蝇伴性与非伴性、连锁与非连锁的遗传分析：只用一种基因型的母本和另外一种基因型的父本果蝇杂交，观察和计数分析子二代的果蝇表型和数量，就可以同时验证遗传学的几大定律：分离定律，自由组合，伴性遗传，连锁和交换。
5.玉米籽粒性状的遗传分析（基因互作验证）：通过计数子一代或者子二代玉米果穗上不同表型性状的玉米籽粒数量，推测可能的亲本基因型，涉及多种基因互作的比例。
6.利用果蝇Gal4/UAS系统研究基因功能；遗传杂交后代的分子验证，例如DNA提取，PCR，电泳等。
四、细胞实验
1.植物细胞中表达的绿色荧光蛋白
2.遗传实验中的细胞内容（见遗传实验）
3.细胞培养及细胞计数
4.显微镜及染色技术
五、生化实验
大分子相互作用实验
1.金属螯合层析
2.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
3.蛋白质免疫印迹
4.考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度
5.多功能酶标仪测定荧光蛋白的吸收发射光谱
6.奶制品中蛋白质的浓度测定及SDS-PAGE电泳
六、分子实验
1.质粒DNA的分离纯化：培养过夜菌→离心收集菌体→悬浮菌体沉淀→裂解菌体→中和去除沉淀→上清液加入吸附柱→洗去杂质后洗脱得到质粒DNA。
2.质粒DNA的限制性内切酶酶切：用微量移液器按照设定的酶切体系将各种试剂分别加入每个离心管内→加样后，混匀并用瞬时离心机离心→置于37℃恒温培养箱内，酶切2-3小时→取出存放-20℃冰箱。
3.琼脂糖凝胶电泳：琼脂糖凝胶制备→DNA样品处理→加样→电泳→用凝胶自动成像系统拍照→分析电泳图谱。
4.大肠杆菌感受态细胞制备及质粒：配制LB固体培养基，高压灭菌后制成平板→CaCl2法制备感受态细胞→细胞转化→观察结果
5.应用PCR基因扩增技术进行性别检测：提取口腔上皮细胞基因组DNA→Y染色体特异片段及Alu基因的扩增（在微量离心管内加入缓冲液，模板DNA，4种dNTP，两种DNA引物和Taq酶，混匀→将样品管置于PCR扩增仪中并设定温度条件，进行扩增→PCR反应结束，用琼脂糖凝胶电泳鉴定）。
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