近日,安徽微分又推出了一款新产品——MicroAnalyLwCas13aNuclease,该产品属于CRISPR系统Ⅱ类Ⅵ型效应蛋白,含有2个高等真核生物和原核生物核苷酸结合highereukaryotesandprokaryotesnucleotide-binding,HEPN)结合域,随后被证实为是一种RNA靶向序列特异性核酸酶。向导RNA通过与靶序列互补来识别靶位点,并将LwCas13aNuclease带到靶RNA上。
本产品是从Leptotrichiawadei克隆的Cas13a基因在大肠杆菌中表达纯化的高纯度Cas13a活性蛋白。
产品组分
保存条件
本品于-75℃~-85℃保存,运输条件:≤0℃
其他试剂
1.导向RNA
2.T7RNApolymerase和NTPS
3.报告分子
适用仪器
荧光检测,可使用AppliedBiosystems,,,,,HT,HTFast,StepOne,StepOnePlus;以及酶标仪等其他能够检测适配荧光波长的仪器均可。
实验流程
使用LwCas13aNuclease荧光检测实验方案
1.反应底物制备
反应底物可为PCR/RPA等方法获得的核酸扩增产物,注意在引物设计时需要在上游引物5’端加上T7启动子(5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’)。
2.按顺序配置反应体系
3.短暂混匀离心后,立即将反应管置于37℃,并设置每3分钟读取记录一次荧光信号,孵育90分钟。
4.结果分析
注意事项
1.本试剂盒结果仅供科研使用。
2.使用前请仔细阅读本说明书。
3.为避免交叉污染,建议模板扩增和酶测反应区域分开设置。
4.不能使用过有效期的产品。
5.实验设置不加模板或者不加crRNA的空白对照,以确认是否有污染。
注:
1、凡是购买微分的Cas13a产品,安徽微分提供所有技术支持
2、产品说明下载链接: