流行性腹泻病毒即PEDV能引起猪的急性、高度传染性和严重的肠道疾病,会导致哺乳仔猪的高死亡率。年末,变异PEDV毒株导致我国PED的大暴发,造成了一百多万头仔猪的死亡。年美国也暴发了变异PEDV导致的PED。目前,PEDV是猪场仔猪流行性腹泻的主要病因,超过70%的仔猪腹泻是由PEDV引起的。
研究显示:苍蝇会传播PEDV病毒感染阴性猪
尽管疫苗免疫的效果不理想,但是目前对流行性腹泻的主要防控方法依然是疫苗免疫。母猪免疫后会产生IgM、IgG、IgA等抗体,仔猪通过吮吸母猪的初乳获得保护抗体。文献显示,对仔猪起保护作用的抗体主要是分泌型的IgA抗体(sIgA),因此检测sIgA的水平有助于判断疫苗免疫后母猪初乳对仔猪的保护性及预测流行性腹泻发病的可能性。
1、抗体的检测方法
目前市售成熟的产品主要有ELISA方法检测总抗体水平或IgA抗体水平。但是ELISA方法操作复杂:
需要专业的技术人员:有一定的专业背景知识和经验;
需要专门的仪器:酶标仪;
需要有一间专门的实验室。
试剂盒保存期短,需要保存在2-8度环境下。
本实验室成功开发基于胶体金免疫层析技术的快速检测试剂,以其操作简单、不必专业知识和高学历人员;检测快速、20分钟完成检测;更适合基层使用。如配合本公司的免疫层析定量分析仪可实现定量检测(见下图)。
2、胶体金检测分泌型IgA抗体检测步骤
待测样品的稀释:用加样器吸取70微升的初乳,加入稀释液中,混匀待测。
测试卡恢复到室温:检测需要在20-30℃下进行,如果测试卡储存在冰箱(2-8℃),在撕开铝箔袋内包装前先在室温环境下平衡30分钟,以免吸潮导致测量结果异常。
测试卡编号:准备好待检样品后,取出所需的测试卡,并在卡片上标记样本编号。
滴加样品反应20分钟:吸取70微升稀释液后的待测样品,滴入测试卡加样孔,水平静置计时20分钟。
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