96T
灵敏度0.3
检测限10/15
检测时间30+15分钟
适用样本组织、蜂蜜等
贮藏避光2-8℃
有效期1年
检测原理在酶标板上预包被抗原,再加入标准品(样本)和抗体,样本或标准品中的被检测物与固定在酶标板上的抗原竞争被检测物抗体,最后加入底物催化显色。此时显色深度与标准品(样本)中被检测物的含量成反比。
检测步骤准备:将要使用的酶标板条插入酶标板架上,并记录各标准品和样品的位置,为减小检测值波动建议做双孔平行实验(每个样本/标准品点两孔),未使用的酶标板条用自封袋密封后,保存于2-8℃环境中以防变质。
加样:向对应微孔中加入标准品工作液/样品溶液20μL,向每孔中加入50μL酶标二抗工作液;再向每孔中加入80μL抗体工作液。
孵育:轻轻振荡酶标板10s,使孔内液体充分混匀后,盖好盖板膜于25℃避光反应30min。
洗涤:取出酶标板后小心揭开盖板膜,倒出板孔中液体后,在每孔加μL洗涤工作液,浸泡15-30s后倒掉洗涤工作液,然后再加入洗涤工作液重复洗涤3-4次后,将酶标板倒置于吸水纸上,用力拍干;
显色:在每孔中加入μL显色液。
孵育:轻轻振荡酶标板10s,使孔内液体充分混匀后,盖好盖板膜于25℃避光反应15min。
终止:在反应后的微孔中加入终止液50μL/孔,底物液由蓝变黄表明终止成功。
读数:终止后的酶标板应在5min内用酶标仪读数,建议使用nm、nm双波长读取酶标板吸光度值。
结果判定依据检测限判定。
注意事项1、室温低于25℃或试剂及样本没有回到室温(25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3、混合要均匀,洗板要彻底,在ELISA分析中的再现性,很大程度上取决于洗板的一致性。
4、在所有孵育过程中,用盖板膜封住微孔板,避免光线照射。
5、不要使用过了有效期的试剂盒,不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6、显色液若有任何颜色表明变质,应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位(Anm0.5)时,表示试剂可能变质。
7、反应终止液有腐蚀性,避免接触皮肤。
●实创生科●西安实创生科生物科技有限公司是一家生物医药类国家高新技术企业,致力于向全球客户提供全方位的疾病诊断、动物疫病诊断和食品安全检测解决方案。
公司建有两条独立的诊断制品GMP生产线(分子学、免疫学)。公司与江南大学、西北农林科技大学、西北工业大学、杨凌职业技术学院、陕西师范大学、中国农业科学院特产研究所、中国农业科学院兰州兽医研究所等科研院所建立了深度的合作。独立或联合开发了非洲猪瘟、布氏杆菌、禽流感、三聚氰胺、β内酰胺类抗生素、瘦肉精类、黄曲霉毒素等各类检测试剂共余种,抗原抗体70余种。秉承“实事求是、锐意创新”的理念,实现“为人类健康保驾护航”的企业使命。
公司旗下有深圳实创生物科技有限公司子公司,该公司目前从事胶体金系列产品的技术研究与开发。
业务板块1.食品安全检测试剂Mel胶体金检测卡、β内酰胺类抗生素检测试剂条、瘦肉精胶体金检测卡、AFI类ELISA检测试剂盒、FQNs快速检测试剂条等共余种产品。
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