土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒(可见分光光度法)
产品货号:BA
产品规格:50管/24样
产品简介:
S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
本法以尿素为基质,利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N,生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
产品组成:
溶液的配制:
1.试剂一:自备甲苯;
2.试剂二:临用前加入20mL蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;
3.试剂四:临用前将A液和B液按体积比1:4混合待用;用多少配多少;
4.试剂五:液体置于试剂瓶内EP管中。临用前加入9.5mL蒸馏水,混匀,待用;用不完的试剂4℃保存;
5.标准品:1mg/mL氮标准液。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、30-50目筛、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30~50目筛。
二、测定步骤
1.分光光度计预热30min以上,调节波长至nm,蒸馏水调零。
2.培养
3.将培养结束的上清液稀释10倍(取0.1mL上清液,加入0.9mL蒸馏水)。若吸光值仍大于1继续稀释。
4.标准品的准备:吸取适量的标准溶液,用蒸馏水稀释至8、6、4、2、1、0.5、0.25、0μg/mL。
5.测氨量
混匀,nm处蒸馏水调零,测A值,ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
标准曲线的建立:根据标准管的浓度(x)和吸光度(y,减去浓度为0的空白管),做标准曲线。
三、S-UE活力计算
根据标准曲线,将ΔA(y)带入公式计算测定中样本的浓度(μg/mL)x值。
单位的定义:每天每g土样中产生1μgNH3-N定义为一个酶活力单位。
S-UE活力(U/g土样)=x×10×V反总÷W÷T=80×x
10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V反总:反应体系总体积,2mL;W:样本质量,0.25g。
相关发表文献:
[1]HouQ,WangW,YangY,etal.Rhizospheremicrobialdiversityand