SOP文件人免疫缺陷病毒抗体双抗原

目的：规范HIV检测操作范围：检验科免疫实验室责任人：免疫实验室专业组长和实验室工作人员检测原理：本试剂盒是采用双抗原夹心原理的ELISA法检测人血清或血浆中的人类免疫缺陷病毒Ⅰ型和（或）Ⅱ型抗体。样品加入包被HIV抗原反应孔，在加入酶标记的HIV抗原，在随后的温育过程中，若样品中含特异性抗体（抗—HIV），则形成“固相HIV抗原—HIV抗体—酶标记HIV抗原”免疫复合物，洗涤后，加入显色剂显色。标本收集：1、最好使用新鲜血清样本，如需保存，可置2-8℃冷藏48小时或-20℃冷冻4周。2、避免使用溶血、浑浊或脂血样本及反复冻融样本。试剂盒组成：1、IV抗原包被板2、HIV酶标记物3、阴性对照4、阳性对照5、20倍浓缩洗液6、底物缓冲液7、底物液8、终止液9、封口袋10、说明书操作程序：1、将试剂盒平衡至室温，取出所需的条板，剩余的即时封存。2、用去离子水或蒸馏水20倍稀释浓缩洗涤液。3、将所需数量的条板固定于支架，按顺序编号，设置样品孔、空白对照孔、阳性对照孔和阴性对照孔（每次实验须设空白对照孔1孔，阳性对照孔2孔，阴性对照孔3孔。）在样品孔中加入50ul待测样品，空白孔不加任何液体，阴性、阳性对照孔分别加入50ul阴性或阳性对照，轻拍混匀。4、置37oC水浴温育30分钟。5、将孔内液体甩干，置洗板机用洗涤液充分洗涤6遍，扣干。（注：洗涤时各孔要加满洗液，勿使孔间交叉感染。采用洗板机时应设定每遍有60秒的浸泡时间。）6、每孔加入50ul酶标记物（空白孔除外），轻拍混匀。7、置37oC水浴温育30分钟。8、将孔内液体甩干，置洗板机用洗涤液充分洗涤6遍，扣干。（注：洗涤时各孔要加满洗液，勿使孔间交叉感染。采用洗板机时应设定每遍有60秒的浸泡时间。）9、每孔加入50ul底物液，轻拍混匀置37oC避光温育30分钟。10、每孔加入50ul终止液终止显色反应。11、测定：酶标仪检测：开机--电击桌面--Auslab酶标实验室--实验--实验名称--HBsAg--读新板--输入板号--点开始--点实验项目（HBsAg）--确定--放置检测板（应先输入阴阳空白对照孔及室内质控孔位置）--点自动编码--确定（仪器检测）--保存--打印结果。注意事项：1、本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV初筛试验室。2、整个HIV检测符合《全国艾滋病检测工作规程》，严格防止交叉感染。操作时必须戴手套、穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。3、HIV-1/HIV-2抗体测定结果的判定必须以酶标仪读数为准。4、样品、酶结合物溶液等应用加液器加注，并经常校对其准确性。5、洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。6、所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。7、微孔板条从冷藏环境中取出时应在室温中平衡至潮气干尽方可使用；未用完者须放入有干燥剂的密封袋中保存。8、用于检测的样品应保持新鲜。9、剩余样品及废弃物应经oC高压蒸汽灭菌30分钟，或用消毒剂处理30分钟后废弃。10不同批号的试剂组份不可混用。临床意义：艾滋病(AIDS)即获得性免疫缺陷综合症，是人获得性免疫缺陷病毒所致的一种严重传染病。HIV是一种逆转录病毒，为单链RNA。外有类脂质包膜，核心含Mg2+依赖性逆转录酶，病毒结构蛋白包括核心蛋白P24和P15，外膜蛋白GP和运转蛋白GP41等，现已分离出两型病毒即HIV-1和HIV-2，当感染HIV数周至半年后绝大多数病人血清中产生抗-HIV抗体。血中抗-HIV阳性可为无症状携带者，由于病毒进入细胞与宿主细胞的染色体DNA整合后不能由体内清除，所以抗-HIV阳性可终身携带。检测抗-HIV(1+2)是AIDS诊断的一个主要指标，也是控制其传播流行的重要手段。1、抗-HIV阳性，如无任何临床症状，可为抗-HIV携带者。抗-HIV阳性可持续数年、数十年以至终身。2、我国及亚洲地区受HIV感染后病人血清中多为抗-HIV(1)型抗体阳性。

3、抗-HIV阳性，特别是确证试验结果阳性，并伴有临床症状时可诊断为艾滋病。

●检验课件

凝血七项检测的临床意义●检验课件

凝血凝固曲线分析●检验课件

临床微生物基础操作规程●检验课件

多重耐药菌防控专家共识●检验课件

二级生物安全实验室建设有用，就点一个“在看”吧戳原文，检验医学推荐用书！预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇

转载请注明：http://www.hongminqing.com/mcc/8345.html