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CCK8试剂盒常见问题解答二

发布时间:2023/12/10 9:58:48   点击数:

1、做细胞活性检测时,每孔应该接种多少个细胞?

答:

当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,个/孔(μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,个/孔(μL培养基)。

2、在实验中吸光度值太高,如果不能减少细胞数量,如何解决?

答:

可以缩短加入CCK-8后的培养时间。例如:可以把加入CCK-8试剂后的培养时间由2小时缩短为1小时。

3、

培养基的本底颜色如酚红会不会影响细胞活性的检测呢?

答:

不会的,培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光值而消去,因此不会对检测造成影响。

4、

只可以在nm波长处测OD值吗?

答:

可以在nm波长处测OD值,但是若无此波长的滤光片,可选择吸光度在-nm之间的滤光片,但是nm滤光片的检测灵敏度最高。

5、

若是暂不检测OD值,该如何处理?

答:

若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。

6、

在实验中OD值太高,怎么解决?

答:

可以缩短加入CCK-8后的培养时间。例如:可以把加入CCK-8试剂后的培养时间由2小时缩短为1小时。此外,可适当减少细胞的数量。

7、

如果OD值太低,怎么解决?

答:

可以采取2个办法:1、适当增加细胞数量2、延长加入CCK-8试剂后的反应时间。

8、

应该每次做标准曲线吗?

答:

建议每次做。虽然细胞是一样的,但是细胞的状态不一定一样。对于状态不一样的细胞,建议每次做标准曲线。

9、

有时在药物作用情况下,细胞已经死亡,但是脱氢酶的活性还在,是否能计算细胞数量?

答:

能。由于CCK-8是通过和细胞内的脱氢酶进行反应间接反映活细胞数量。

10、

悬浮细胞和贴壁细胞在数量上有何区别?

答:

悬浮细胞由于显色比较困难,一般需要增加细胞数量和延长培养时间。贴壁细胞显色比较容易,若细胞数量过大,有时吸光度会超过酶标仪的读数。

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