我们都能用什么实验室诊断方法来诊断非洲猪瘟？我们应该根据实际情况如何选择？如何判定结果？
一、可用的检测方式：
下图显示了检测中使用的不同分析物的浓度（Y轴）随时间（X轴）的变化。散毒后，病毒性血症将在接触后1至2天内开始，持续约3-4周。血清转化（抗体检测）通常发生在接触后14天，持续数月或数年。
图1。病毒和抗体检测的示意图，以及ASF散毒后分离的毒性的变异性。资料来源：欧盟非洲猪瘟参考实验室。
1、聚合酶链反应（PCR）
检测是否存在病毒核酸的特定序列（DNA）样本类型：血清、全血或组织优点：检测剂最敏感和首选的方法，中等成本，通常可以合并样品以降低成本，同时最大限度地降低敏感性损失缺点：不能使用血清，需要全血需要适当的底物
2、血液吸附试验（HAT）
通过将红细胞附着在ASFV-受感染的猪巨噬细胞的外部（细胞质）膜上来检测病毒的存在样本类型：血清或血浆优点：标准参考测试之一缺点：少数现场菌株不会引起血液吸附，阴性结果通常需要通过PCR确认
3、抗原检测酶联免疫吸附剂检测（Ag-ELISA）
检测抗原的存在样本类型：通常全血和可能的其他特定组织（必须遵循试剂盒建议）优点：可用商业套件相对便宜缺点：灵敏度比PCR低得多，不建议合并样本，阴性结果通常需要通过PCR确认
4、抗体检测酶联免疫吸附剂检测（Ab-ELISA）
检测抗体的存在示例类型：血清或血浆优点：动物在数月到数年内保持阳性，可用于慢性病例，可用于低毒性/亚临床病例，血清转换可在7-10天内发生，目前还没有疫苗可以混淆对阳性结果的解释缺点：动物血清呈阳性需要7到10天，无法区分母体抗体与接触病毒产生的抗体
5、间接荧光抗体（IFA）
检测抗体的存在样本类型：血清或血浆优点：非预期ELISA阳性样本的确认测试缺点：要求动物被感染至少1周，不适用于大量样本，受病毒影响的结果隔离用于检测，可靠性高度依赖于技术人员的技能
图2。显示使用ASFIFA作为样品的确认测试的图表，非预期测试ASFELISA阳性。检测ELISA阴性的疑似阴性样本被认为是阴性。如果此样本意外检测呈阳性，则ASFIFA可以作为确认测试进行。即如果IFA检测呈阳性，则确认样本为阳性。如果IFA测试为阴性，那么只要PCR也呈阴性，则假设这是假阳性，以便确认近期没有感染。
6、间接免疫过氧化酶测试（IPT）
检测抗体的存在样本类型：血清或血浆优点：非预期ELISA阳性样本的确认测试缺点：要求动物被感染至少1周，不适用于大量样本，受病毒影响的结果隔离用于检测，可靠性高度依赖于技术人员的技能
图3。显示使用ASFIPT作为样品的确认测试的图表非预期测试ASFELISA阳性。检测ELISA阴性的疑似阴性样本被认为是阴性。如果此样本意外检测呈阳性，则可以将ASFIPT作为确认测试进行。即如果IPT测试呈阳性，则确认样本为阳性。如果IPT测试呈阴性，那么只要PCR也呈阴性，则假设这是假阳性，以便确认近期没有感染。
二、检测结果解释：
通常需要多次检测才能更好地解释ASF诊断。
表1。对ASF诊断结果的解释。资料来源：欧盟非洲猪瘟实验室。
1、PCR
阳性：病毒存在：当前感染阴性：如果检测在感染后较晚发生，则可能漏报阴性或病毒
2、HAT
阳性：病毒存在：当前感染阴性：阴性，感染非血吸虫分离，或病毒可能错过，如果测试发生在感染后较晚。必须用PCR确认阴性
3、Ag-ELISA
阳性：病毒存在：当前感染阴性：阴性，病毒存在，但浓度低，或者如果检测在感染后较晚发生，可能会错过病毒。必须用PCR确认阴性
4、Ab-ELISA
阳性：母体抗体或过去接触野生病毒（7-10天）阴性：阴性或野生型感染检测为时尚早
5、IFA
阳性：母体抗体或过去接触野生病毒（7-10天）阴性：阴性或野生型感染检测为时尚早
6、IPT
阳性：母体抗体或过去接触野生病毒（7-10天）阴性：阴性或野生型感染检测为时尚早
三、场景应用
1、任何日龄猪疑似急性ASF疫情
采集多只受感染动物全血，并通过PCR进行测试，可考虑样本混合。收集死猪脾脏和扁桃体，并通过PCR进行测试，可考虑样本混合。
照片1。采集样本以防疑似ASF
2、怀疑任何日龄的无死亡的猪存在慢性非瘟感染
从30头有临床症状（定点采样）或随机采样（无临床迹象）的猪身上采集全血，并通过PCR（可考虑样本混合）进行检测，并单独用Ab-ELISA进行检测。
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