谷胱甘肽还原酶活性检测试剂盒（货号：AKPR）
谷胱甘肽还原酶（GR）是维持细胞中还原型谷胱甘肽（GSH）含量的主要黄素酶，作为谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶之一，能够催化氧化型谷胱甘肽（GSSG）还原为还原型谷胱甘肽（GSH），有助于维持体内GSH/GSSG比值，在氧化胁迫反应和抗坏血酸-谷胱甘肽循环途径中起着重要作用。
GR能催化NADPH还原GSSG生成GSH，同时NADPH脱氢生成NADP+，NADPH在nm处具有特征吸收峰，通过吸光值的变化即可表征谷胱甘肽还原酶的活性。
谷胱甘肽还原酶活性检测原理测定过程中所需要的仪器和试剂：紫外分光光度计、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。
1.粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量及比例）
按照组织质量（g）：试剂一体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1g组织，加入1mL试剂一）处理样品，冰浴匀浆，4℃rpm离心10min，取上清即为粗酶液，置于冰上待测。
吸光值测定：①迅速混匀并开始计时，测定10s（总时间）时nm处吸光值，记为A1测定和A1空白；②将比色皿连同反应液放入37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）恒温水浴/培养箱中，反应s后，测定s（总时间）时nm处吸光值，记为A2测定和A2空白；③计算A测定=A1测定-A2测定，A空白=A1空白-A2空白，A=A测定-A空白。注：空白组只需测定1-2次。
注意事项
①粗酶液制备等过程均需要在冰上进行，建议样品处理后当天完成测定，粗酶液避免反复冻融；
②试剂一中含有一定浓度的蛋白（约0.1mg/mL），测定样品蛋白浓度时需减去本身的蛋白含量；
③反应过程中应保持37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）恒温，建议在烧杯中装入适量37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）蒸馏水，将此烧杯放入37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）恒温水浴中，在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中；
④准确在10s和s处完成读数，以保证实验结果的准确性；
⑤为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。
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