多聚半乳糖醛酸酶（PG）活性检测试剂盒(货号：AKSU)
一、产品描述
多聚半乳糖醛酸酶（PG）是降解植物细胞壁果胶的主要酶，可催化果胶分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸裂解，通过降解果胶使细胞壁结构解体促使果实软化，其活性与果实成熟、叶和花的脱落、病原物防御、细胞伸展发育以及木质化密切相关，在植物抗病性和食品贮藏保鲜领域具有重要应用。
多聚半乳糖醛酸酶能够水解多聚半乳糖醛酸生成半乳糖醛酸，进一步与DNS反应生成红棕色物质，产物在nm处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可表征多聚半乳糖醛酸酶的活性。
多聚半乳糖醛酸酶活性检测原理1.粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量及比例）
①组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1g组织，加入1mL提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃g离心10min，取上清置于冰上待测。
②细菌或细胞：离心收集细菌或细胞至离心管内，按照细菌或细胞数量（个）：提取液体积（mL）为（-）：1的比例（建议万细菌或细胞加入1mL提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功率W，超声3s，间隔7s，总时间3min），4℃g离心10min，取上清置于冰上待测。
③液体样本：直接检测或适当稀释后再进行检测。
2.测定步骤
①分光光度计预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
吸光值测定：将反应液置于1mL玻璃比色皿中，测定nm处吸光值，记为A测定、A对照、A标准和A空白；计算A测定=A测定-A对照，A标准=A标准-A空白。注：空白管只需测定1-2次，每个样品均需设一个对照管。
标准曲线的建立：以2.0、1.6、1.2、0.8、0.4、0.2mg/mL为横坐标（x），以其对应的A标准为纵坐标（y），绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将A测定带入公式中得到x（mg/mL）。
四、注意事项
①粗酶液应置于冰上待测，建议提取完成后当天完成检测；
②若测定吸光值超出标准线性吸光值范围：高于最高值建议将粗酶液适当稀释后再进行测定，低于最低值建议适当增加样本量或适当延长酶促反应时间后再进行测定，计算时相应修改；
③为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。
ForResearchUseOnly.NotforUseinDiagnosticProcedures.
