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脱氧核糖核酸酶IDNaseI特性及应

发布时间:2024/1/18 19:53:09   点击数:
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DNaseI(DeoxyribonucleaseI)中文名称为脱氧核糖核酸酶I,是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNaseI水解单链或双链DNA后的产物,5端为磷酸基团,3端为羟基。DNaseI活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下,DNaseI可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNaseI可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。

1.反应式

最适pH值为7.0。

2.米氏常数

尚无报道。

3.专一性

脱氧核糖核酸酶I是一种核酸内切酶,它能水解天然的与变性的脱氧核糖核酸高聚物,生成一至八个带有5-磷酸末端游离基的核苷酸的复杂混合物,但是对RNA无活性。此酶能优先作用于嘌呤与吡啶核苷酸毗邻的键。

4.激活剂与抑制剂

此酶可被Mg2+激活,亦可被牛脾中抑制剂、放线菌素D、溴化乙锭以及柠檬酸等物质所抑制。

5.纯度要求

所需的纯度至少应为每毫克蛋白含2,单位,不应含有核糖核酸酶(RNase)。

6.意义

脱氧核糖核酸酶已用作液化浓性渗出液的临床制剂,从而,降低了肺炎球菌引起的脑膜炎以及特殊肺病患者的死亡率。此外,对于患生殖泌尿道疾病,此酶能有效地分解脓液,因而防止排泄堵塞。此酶还可用来破坏由病毒DNA的致癌活力。

7.稳定性

制成冷冻干粉酶制剂保存在5℃下,可稳定2~5年之久。

二、测定方法

最常用的方法反应原理,即通过脱氧核糖核酸酶的解聚作用,而于nm处测量吸光率的增量。在特定的条件下,温度为25℃时,每毫升溶液每分钟能使吸光率增加0.,即定为一个活性单位。



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