谷氨酰胺合成酶活性检测试剂盒（货号：AKAM）
谷氨酰胺合成酶（GS）作为高等植物氮代谢中的关键酶，能够催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺参与氨同化过程，不仅可以防止铵离子过多造成的生物毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式，谷氨酰胺合成酶活性可作为衡量植物氮素同化水平的一项重要生理指标。
谷氨酰胺合成酶在ATP和Mg2+存在下，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺，谷氨酰胺进一步转化为γ-谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成红色的络合物，产物在nm处具有特征吸收峰，通过吸光值的变化即可表征谷氨酰胺合成酶的活性。
谷氨酰胺合成酶活性检测原理测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。
1.粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量及比例）
①组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1g组织，加入1mL提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃g离心10min，取上清置于冰上待测。
②细菌或细胞：离心收集细菌或细胞至离心管内，按照细菌或细胞数量（10个）：提取液体积（mL）为（-）：1的比例（建议万细菌或细胞加入1mL提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功率20%或W，超声3s，间隔10s，重复30次），4℃g离心10min，取上清置于冰上待测。
③血清（浆）、培养液等液体样本：直接检测或适当稀释后再进行检测。
2.测定步骤
①分光光度计预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
②在离心管中依次加入下列试剂：
吸光值测定：取上清液至1mL玻璃比色皿中，测定nm处吸光值，记为A测定和A对照，计算A测定=A测定-A对照。注：每个测定管均需设一个对照管。
注意事项
为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。
ForResearchUseOnly.NotforUseinDiagnosticProcedures.
